流式细胞仪的购买和相关注意事项

流式细胞分析技术在现代细胞分子生物学研究中起着越来越重要的作用，这种分析技术是通过对单个细胞性状的快速测定，并结合先进的计算机分析系统，使得在短时间内可对大量细胞进行定性、定量测定。但以往进行流式细胞仪操作和分析需要技术熟练的研究团队，而且这一设备价值也不菲——起码也要10万美元，有些甚至达到50万美元，这对于许多实验室来说并不容易负担。

近年来一些主流生物技术企业相继推出了新型流式细胞仪，让这一技术变得更加容易操作，也更加实惠了。目前的流式细胞仪分析系统设置大部分都是自动化的，相关试剂盒也经过了多次验证，简化了操作，降低了入门门槛。一些大型的公司，比如Sony和BD加大了研发力度，开发出了10万美元以下的流式细胞仪，客户群由中心实验室转向了个体研究人员。但是这些新型的流式细胞仪也不是说就能立即上手的，用户在购买之前要弄清楚这一技术到底能做什么，不能做什么，有时实验室购买了流式细胞仪后觉得又不适用了，这样即浪费资源，也耽误时间，因此了解自己需要什么，了解不同仪器的优缺点十分重要。以下是目前市面上较受关注的几个新型流式细胞仪，通过分析它们的优点和缺点，也许您在选购的时候就更有目的性了。

Attune Acoustic Focusing Cytometer

这是一款由美国能源部国家实验室（洛斯阿拉莫斯国家实验室）研制的新型流式细胞分析仪，去年春天由ABI（Life Technologies）公司投入到了市场，是市场上第一台用声波精确控制细胞移动的流式细胞计数系统，荣获了2010年生物通生命科学十大创新产品称号，以及The Scientist杂志2010十大创新技术称号。

流式细胞仪的原理在于让细胞穿过激光检测设备，从而使科学家们得以对细胞进行计数和检测，这一仪器的技术关键在于其灵敏分辨率和样品进样分析速度，在此之前，研究人员必须在两者之间二选一，取其平衡点，而Attune声波聚焦原理的流式细胞仪的诞生解决了这个矛盾，研究人员能够同时将速度和分辨率最大化，并在检测点开展cell-by-cell的细胞分析。声波聚焦的使用也增加了样品量，达到1mL/分钟，而目前市场上最快的传统流式细胞仪也只有160 μL/分钟，这让用户能更有效地分析相对稀释的样品，比如干细胞，因为样品中的颗粒能在检测点浓缩。另外Attune声波聚焦流式细胞仪是405nm紫色激光和488nm蓝色双激光设计，其中紫色激光要比其它一些经济型流式细胞仪中用到的标准激光马力更大，目前Life Technologies也针对这一仪器推出了优化探针，更有利于研究人员实验操作。

Attune声波聚焦流式细胞仪可帮助科学家们实现对细胞群体中大量异质细胞进行统计学数据的采集，以便研究包括大小、复杂性、表型和健康情况在内的细胞群体参数。Attune的专利技术可让科学家们获得更高的灵敏度，通过增加通量来节约时间，并可用于体积小的样品。除此之外，Attune在提供这些升级性能的同时，还凭借紧凑的声学技术而实现了体积小，以及开展实验所需的消耗品量更少等优势。这些独特的特征将有助于实现传统细胞仪系统所无法实现的科研应用，从样品分离制备到微珠为基础的样品分析。但是也要注意的是，Attune声波聚焦流式细胞仪并没有安装红色激光——这是一些用户比较喜欢的光源。而且在一些常用的流式细胞分析过程中，样品都是高浓度，低体积的，如果用Attune，还要购买价格稍贵的tag，可能划不来。

购买流式细胞仪注意事项：

明确目的：在购买流式细胞仪之前要考虑清楚自己的实验目的，这些新型流式细胞仪并不是万能的，比如说如果想要检测亚微分辨率的微粒，这些低端的仪器就都不合适。就荧光检测而言，有研究人员就认为这些经济实惠的新型流式细胞仪在分辨模糊昏暗的细胞群体方面，不如那些贵一点的流式细胞仪，比如BD的FACSCanto II、BD LSR II，以及Beckman Coulter Gallios，假如您需要研究分析磷酸化受体和未磷酸化受体的话，可能就要重新考虑流式细胞仪的选择了。

想想5年后的情况：要考虑清楚：需要分析多少样品，进行怎样的实验？预期的参数是多少？在未来的实验中研究需求的数量和复杂性是否会增加？是否有可能升级到你想要的仪器？如果这些仪器不能满足未来实验的要求，也许还是应该选择在中心实验室中进行实验。

费用总计：进行流式细胞实验所需要的花费并不仅仅是指花在试剂盒，过滤器，其它耗材上的钱，还有零件的更换，以及安装这些零件花费的时间。一台EasyCyte流式细胞仪细心维护，半年也需要400美元，一些传统的流式细胞仪更是要花费上千。除此之外还有服务费用。

仪器检测：如果已经下决心购买流式细胞仪了，那么可以联系中心实验室，询问是否有这种仪器的演示实验，一些中心实验室都会召集一些研究人员在样板机器中进行常见的实验操作，并分析这些结果与其它仪器结果的区别。如果不能到中心实验室中检测，那么可以在实验室中自己检测，看看机器的使用和维护情况。

自我培训：随机一般都有软件，但是这并不是说在实验过程中，就不会把荧光背景当作一个假阳性信号，因此研究人员还是需要花些时间进行流式细胞分析培训的。有些免费的在线课程，以及相关的各领域资料，比如干细胞生物学等，当然更好的是能找到专家咨询，许多研究机构都有一些免费的短期课程，大家可以多多留意。