荧光分光度计的应用用途、原理和使用步骤

摘要：荧光分光光度计生物化学、生物医学、环境化工已经得到普遍的运用，本文主要介绍了荧光分光光度计功能特点、荧光分光光度计分类和优缺点分析、其次介绍了荧光分光光度计产品应用及用途和它的原理，最后介绍了荧光分光度计使用的详细步骤。

荧光分光光度计功能特点

1． 荧光发射光谱

选择某一固定波长的光激发样品，记录样品中产生的荧光发射强度与发射波长间的函数关系，即得荧光发射光谱。

2． 荧光激发光谱

选定某一荧光发射波长记录荧光发射强度作为激发光波长的函数，即得荧光激发光谱。

3．时间分辨技术；

可用于对混合物中光谱重叠但有寿命差异的组分进行分辨并分别测量。

时间分辨荧光测定公式如下：

P（t） = P0 EXP （-t /τ）

式中P（t）：拟合指数函数

P0：强度取值

EXP：指数运算符

t：时间取值

τ：荧光平均时间寿命

荧光分光光度计分类

荧光光谱法具有灵敏度高、选择性强、用样量少、方法简便、工作曲线线形范围宽等优点，可以广泛应用于生命科学、医学、药学和药理学、有机和无机化学等领域。

荧光分光光度计的发展经历了手控式荧光分光光度计，自动记录式荧光分光光度计，计算机控制式荧光分光光度计。

光分光光度计三个阶段;荧光分光光度计还可分为单光束式荧光分光光度计和双光束式荧光分光光度计两大系列。其他的还有低温激光Sh p ol’skill荧光分光光度计，配有寿命和相分辩测定的荧光分光光度计等。

荧光分光光度计优缺点

优点：

灵敏度高，可以用于扫描液相荧光标记物所发出的荧光光谱，不但可以做一般的定量分析， 而且还可以推断分子在各种环境下的构象变化， 从而阐明分子结构与功能之间的关系。

缺点：

1、荧光的光强并不高，所以呈线性情况有时不很理想；

2、某些反应荧光持续的时间较短；

3、荧光的发散方向不集中，不像透射光那样集中，强度高；

4、受某些离子的干扰影响，荧光会湮灭，试验速度必须要快。

荧光分光光度计主流产品

上海棱光生产的F96系列、F97系列荧光分光光度计、顶级F98荧光分光光度计；

天津港东生产的F-380型、F-320型、F-280型荧光分光光度计；

天津拓普生产的WFY-28型荧光分光光度计；

上海三科生产的970CRT型荧光分光光度计；